色譜法是一種分離和分析混合物中各組分的方法，它涉及許多專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)，以下是一些常見(jiàn)術(shù)語(yǔ)的解釋說(shuō)明：

一、基本組成部分相關(guān)術(shù)語(yǔ)

  1. 固定相

• 定義：在色譜柱中相對(duì)固定不動(dòng)的物質(zhì)。它可以是固體吸附劑（如硅膠、氧化鋁等），也可以是涂漬在固體載體上的液體（如角鯊?fù)橥繚n在硅藻土上）。

• 作用：與樣品中的各組分發(fā)生相互作用，使不同組分在色譜柱中得到分離。例如，在液-固吸附色譜中，硅膠作為固定相，利用其表面的硅羥基對(duì)不同極性的化合物產(chǎn)生吸附作用。

  2. 流動(dòng)相

• 定義：在色譜過(guò)程中不斷流動(dòng)的物質(zhì)，它攜帶樣品通過(guò)色譜柱。流動(dòng)相可以是氣體（如氮?dú)狻�氫氣等，在氣相色譜中使用），也可以是液體（如甲醇、乙腈等，在液相色譜中使用）。

• 作用：為樣品組分提供一個(gè)流動(dòng)的環(huán)境，使組分能夠在固定相和流動(dòng)相之間進(jìn)行分配或吸附-解吸等過(guò)程，從而實(shí)現(xiàn)分離。例如，在反相液相色譜中，以甲醇-水作為流動(dòng)相，它能夠溶解樣品并推動(dòng)其在色譜柱中流動(dòng)，使樣品組分在固定相（如十八烷基硅烷鍵合硅膠）和流動(dòng)相之間分配。

二、分離過(guò)程相關(guān)術(shù)語(yǔ)

  1. 保留時(shí)間（tR）

• 定義：從樣品注入色譜柱開(kāi)始，到某一組分的色譜峰出現(xiàn)在檢測(cè)器上所經(jīng)歷的時(shí)間。

• 意義：不同組分由于與固定相和流動(dòng)相互作用強(qiáng)弱不同，其保留時(shí)間也不同，可以作為定性分析的依據(jù)。例如，在一個(gè)藥物分析中，已知藥物成分的標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)間，當(dāng)樣品中出現(xiàn)相同保留時(shí)間的色譜峰時(shí)，可以初步判斷該組分為該藥物成分。

  2. 死時(shí)間（t0）

• 定義：不與固定相發(fā)生相互作用的組分（如空氣）通過(guò)色譜柱所需的時(shí)間。

• 作用：用于計(jì)算其他色譜參數(shù)，如保留因子。死時(shí)間可以通過(guò)注入一個(gè)不與固定相相互作用的物質(zhì)來(lái)測(cè)定，例如，在液相色譜中，通常用尿嘧啶來(lái)測(cè)定死時(shí)間。

  3. 保留因子（k）

• 定義：組分在固定相中停留的時(shí)間與在流動(dòng)相中停留的時(shí)間之比，即 k=（tR-t0）/t0。

• 意義：反映了組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配情況。k 值越大，說(shuō)明組分在固定相中停留的時(shí)間越長(zhǎng)，與固定相的相互作用越強(qiáng)。例如，對(duì)于極性較強(qiáng)的組分，在極性固定相上的 k 值通常較大。

  4. 分配系數(shù)（K）

• 定義：在一定溫度和壓力下，組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配達(dá)到平衡時(shí)，組分在固定相和流動(dòng)相中的濃度之比。

• 作用：它是一個(gè)熱力學(xué)參數(shù)，與保留因子密切相關(guān)，K 值越大，保留時(shí)間越長(zhǎng)。例如，在液-液分配色譜中，根據(jù)組分在兩種互不相溶的液體（固定相和流動(dòng)相）中的溶解度差異，K 值不同，從而實(shí)現(xiàn)分離。

三、色譜峰相關(guān)術(shù)語(yǔ)

  1. 峰面積（A）

• 定義：色譜峰與基線所包圍的面積。

• 意義：與組分的含量成正比，是定量分析的重要參數(shù)。例如，在高效液相色譜分析中，通過(guò)測(cè)量峰面積可以準(zhǔn)確地確定樣品中各組分的含量。

  2. 峰高（h）

• 定義：色譜峰的最高點(diǎn)到基線的垂直高度。

• 意義：也可以用于定量分析，但在一些復(fù)雜情況下，如峰形不對(duì)稱(chēng)時(shí)，峰面積的準(zhǔn)確性更高。

  3. 拖尾因子（T）

• 定義：用于衡量色譜峰的對(duì)稱(chēng)性，是色譜峰后半部分寬度與前半部分寬度的比值。

• 意義：理想的色譜峰拖尾因子應(yīng)接近 1，如果拖尾因子大于 1.2，說(shuō)明色譜峰有拖尾現(xiàn)象，可能是由于固定相污染、進(jìn)樣量過(guò)大等原因?qū)е碌摹?/p>

四、柱性能相關(guān)術(shù)語(yǔ)

  1. 塔板高度（H）

• 定義：理論塔板高度是色譜柱效的衡量指標(biāo)，它表示色譜柱中相當(dāng)于一塊理論塔板的高度。計(jì)算公式為 H=L/n（L 為色譜柱長(zhǎng)度，n 為理論塔板數(shù)）。

• 意義：H 值越小，柱效越高，分離效果越好。例如，一根高效液相色譜柱的塔板高度通常在幾微米到幾十微米之間。

  2. 理論塔板數(shù)（n）

• 定義：根據(jù)色譜峰的寬度和保留時(shí)間計(jì)算得到的理論塔板數(shù)，用于衡量色譜柱的分離能力。計(jì)算公式為 n=5.54×（tR/σ）²（σ 為色譜峰的標(biāo)準(zhǔn)偏差）。

• 意義：n 值越大，色譜柱的分離能力越強(qiáng)。例如，對(duì)于一個(gè)復(fù)雜混合物的分離，需要較高的理論塔板數(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)良好的分離效果。

  3. 分離度（R）

• 定義：相鄰兩個(gè)色譜峰的保留時(shí)間之差與兩個(gè)色譜峰平均寬度的比值。計(jì)算公式為 R=2×（tR2-tR1）/（W1+W2）（W1 和 W2 分別為兩個(gè)色譜峰的寬度）。

• 意義：R 值越大，說(shuō)明兩個(gè)組分的分離程度越高。一般來(lái)說(shuō)，R≥1.5 時(shí)，可以認(rèn)為兩個(gè)組分達(dá)到了基線分離。

五、分離性能相關(guān)術(shù)語(yǔ)

1. 選擇性因子（α）

• 定義：相鄰兩個(gè)組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)（K）的比值，即\(\alpha=K_2/K_1\)（\(K_1\)和\(K_2\)分別為兩個(gè)組分的分配系數(shù)）。

• 意義：選擇性因子反映了色譜柱對(duì)不同組分的分離能力。當(dāng)\(\alpha=1\)時(shí)，兩個(gè)組分無(wú)法分離；當(dāng)\(\alpha>1\)時(shí)，組分 2 比組分 1 更容易保留在固定相中。選擇性因子越大，分離效果越好。

• 例子：在分析兩種結(jié)構(gòu)相似的化合物時(shí)，選擇性因子可以用來(lái)評(píng)估色譜柱的分離能力。

2. 容量因子（k）

• 定義：組分在固定相中的濃度與流動(dòng)相中的濃度之比，即\(k=C_s/C_m\)（\(C_s\)為固定相中的濃度，\(C_m\)為流動(dòng)相中的濃度）。

• 意義：容量因子反映了組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配情況。容量因子越大，組分在固定相中停留的時(shí)間越長(zhǎng)，保留時(shí)間也越長(zhǎng)。

• 例子：在反相液相色譜中，極性較強(qiáng)的組分通常具有較小的容量因子，而疏水性較強(qiáng)的組分具有較大的容量因子。

3. 范氏方程（Van Deemter Equation）

• 定義：描述色譜峰展寬的方程，表達(dá)式為\(H=A+B/u+C u\)，其中：

• \(A\)：渦流擴(kuò)散項(xiàng)，與固定相的均勻性有關(guān)。

• \(B\)：縱向擴(kuò)散項(xiàng)，與流動(dòng)相的擴(kuò)散系數(shù)和流速有關(guān)。

• \(C\)：傳質(zhì)阻力項(xiàng)，與固定相和流動(dòng)相的傳質(zhì)速率有關(guān)。

• \(u\)：流動(dòng)相的線速度。

• 意義：范氏方程用于解釋影響色譜柱效的因素，幫助優(yōu)化色譜條件以提高分離效果。

• 例子：通過(guò)調(diào)整流動(dòng)相流速（\(u\)），可以找到最佳流速以最小化塔板高度（\(H\)），從而提高柱效。

六、色譜柱性能相關(guān)術(shù)語(yǔ)

1. 柱效（Column Efficiency）

• 定義：衡量色譜柱分離能力的指標(biāo)，通常用理論塔板數(shù)（\(n\)）或塔板高度（\(H\)）表示。

• 意義：柱效越高（即\(n\)越大或\(H\)越�。�，色譜柱的分離能力越強(qiáng)。

• 例子：高效液相色譜柱的理論塔板數(shù)通常在 10,000 以上，而普通柱可能只有幾千。

2. 柱壓（Column Pressure）

• 定義：流動(dòng)相通過(guò)色譜柱時(shí)產(chǎn)生的壓力。

• 意義：柱壓過(guò)高可能表明柱子堵塞或流動(dòng)相粘度過(guò)高，需要檢查或更換柱子。

• 例子：在反相液相色譜中，使用小粒徑填料的柱子通常柱壓較高。

3. 柱溫（Column Temperature）

• 定義：色譜柱的操作溫度。

• 意義：柱溫影響組分的保留時(shí)間和分離效果。通常通過(guò)柱溫箱控制柱溫。

• 例子：在氣相色譜中，柱溫通常需要精確控制以獲得穩(wěn)定的保留時(shí)間。

七、檢測(cè)相關(guān)術(shù)語(yǔ)

1. 檢測(cè)限（Detection Limit,DL）

• 定義：檢測(cè)器能夠檢測(cè)到的最低濃度或質(zhì)量。

• 意義：檢測(cè)限越低，檢測(cè)器的靈敏度越高。

• 例子：在環(huán)境分析中，檢測(cè)限通常需要達(dá)到 ppb（十億分之一）級(jí)別。

2. 定量限（Quantitation Limit,QL）

• 定義：能夠進(jìn)行可靠定量分析的最低濃度或質(zhì)量。

• 意義：定量限通常高于檢測(cè)限，確保定量分析的準(zhǔn)確性和精密度。

• 例子：在藥物分析中，定量限需要滿(mǎn)足藥品質(zhì)量控制的要求。

3. 響應(yīng)因子（Response Factor,RF）

• 定義：檢測(cè)器對(duì)某一組分的響應(yīng)與該組分濃度的比值。

• 意義：響應(yīng)因子用于校正不同組分在檢測(cè)器上的響應(yīng)差異。

• 例子：在火焰離子化檢測(cè)器（FID）中，不同有機(jī)化合物的響應(yīng)因子可能不同。

八、方法驗(yàn)證相關(guān)術(shù)語(yǔ)

1. 準(zhǔn)確度（Accuracy）

• 定義：測(cè)量值與真實(shí)值之間的接近程度。

• 意義：準(zhǔn)確度反映了分析方法的正確性。

• 例子：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品的分析驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確度。

2. 精密度（Precision）

• 定義：多次測(cè)量值之間的一致性。

• 意義：精密度反映了分析方法的重復(fù)性和可靠性。

• 例子：在重復(fù)進(jìn)樣中，峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）通常用于評(píng)估精密度。

3. 線性范圍（Linear Range）

• 定義：檢測(cè)器響應(yīng)與組分濃度成線性關(guān)系的范圍。

• 意義：線性范圍越寬，分析方法的適用范圍越廣。

• 例子：高效液相色譜的線性范圍通常為 2-3 個(gè)數(shù)量級(jí)。

4. 穩(wěn)定性（Stability）

• 定義：樣品在儲(chǔ)存或分析過(guò)程中保持其化學(xué)性質(zhì)不變的能力。

• 意義：穩(wěn)定性影響樣品的保存時(shí)間和分析結(jié)果的可靠性。

• 例子：某些易降解的化合物需要在低溫下保存以確保穩(wěn)定性。

九、其他術(shù)語(yǔ)

1. 梯度洗脫（Gradient Elution）

• 定義：在液相色譜中，流動(dòng)相的組成或強(qiáng)度隨時(shí)間逐漸變化的洗脫方式。

• 意義：梯度洗脫可以提高復(fù)雜樣品的分離效率。

• 例子：在分析生物樣品中的多肽時(shí)，通常使用梯度洗脫。

2. 等度洗脫（Isocratic Elution）

• 定義：在液相色譜中，流動(dòng)相的組成和強(qiáng)度保持恒定的洗脫方式。

• 意義：等度洗脫適合分離保留行為差異較大的組分。

• 例子：在分析藥物中的雜質(zhì)時(shí)，等度洗脫可以提供穩(wěn)定的保留時(shí)間。

3. 內(nèi)標(biāo)法（Internal Standard Method）

• 定義：在樣品中加入已知濃度的內(nèi)標(biāo)物，通過(guò)比較內(nèi)標(biāo)物和目標(biāo)組分的響應(yīng)值進(jìn)行定量分析。

• 意義：內(nèi)標(biāo)法可以校正儀器波動(dòng)和進(jìn)樣量誤差，提高定量分析的準(zhǔn)確性。

• 例子：在氣相色譜分析中，常用十烷作為內(nèi)標(biāo)物。

4. 外標(biāo)法（External Standard Method）

• 定義：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量分析，即用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，再通過(guò)樣品的響應(yīng)值進(jìn)行定量。

• 意義：外標(biāo)法簡(jiǎn)單直接，但需要嚴(yán)格控制儀器條件。

• 例子：在高效液相色譜中，外標(biāo)法是最常用的定量方法之一。